Правила забора назальных мазков и оральных жидкостей у свиней

42870
©

В статье найдете практические советы по забору назальных мазков и оральных жидкостей у свиней для лабораторной диагностики.

ВЫБОР ЖИВОТНЫХ ДЛЯ ЗАБОРА ОБРАЗЦОВ ДЛЯ АНАЛИЗА

Зависит от цели:

  • выявить инфекцию: выбирают свиней с клиническими признаками заболевания;
  • подтвердить отрицательный статус стада по определенному заболеванию — образцы от животных, избранных наугад;
  • определить статус инфекции в стаде во временном срезе - первые образцы забирают в первую день проявления симптомов заболевания и повторяют забор в тех же животных через определенный период, например 2-4 недели;
  • определить статус инфекции в различных группах животных (перекрестное исследование) - забирают образцы у животных разного возраста, например 4-х, 8-и, 12-и, 16-и, 20-и и 24-недельного.

Справка

Назальные образцы собирают для выявления возбудителей бактериальных заболеваний респираторного тракта (методом бактериального посева). Например, B. Bronchiseptica и токсигенной P. Multocida, вызывающих инфекционный атрофический ринит свиней.

Исследование методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) обнаружит вирусных возбудителей респираторных заболеваний, например, гриппа свиней, а также микоплазму — M. Hyopneumoniae.

 

Комментарий эксперта

Виталий Чмут, врач ветеринарной медицины ПСП «Нива», Кировоградская обл.

«Для мониторинга заболеваний в стаде осуществляем лабораторную диагностику образцов клинического материала — крови, спермы хряков, иногда слюны свиней (в отечественной практике этот метод выявления патогенов пока малораспространенный). Частота их забора зависит от технологической группы животных: маточное стадо — раз в год, товарные поросята — каждую партию животных, которых закупили.

В основном исследуем образцы на микоплазму, цирковирус 2-го типа (ЦВС-2), РРСС, парвовироз и гемофилез. Реже — на болезнь Ауески, грипп свиней, ротавирус, хламидиоз, лептоспироз. Образцы для исследования методом ПЦР и ИФА направляем в Центр ветеринарной диагностики и Научно-исследовательский центр биобезопасности и экологического контроля ресурсов АПК "Biosafety-Center"».

 

ПОДГОТОВКА К ЗАБОРУ ОБРАЗЦОВ

Назальные мазки

  • Не следует забирать образцы у животных в больших группах, поскольку из-за паники свиньи могут травмировать друг друга или ветеринара во время манипуляций.
  • Убедитесь, что животное хорошо зафиксировано.
  • Зона, где находится животное во время забора образцов, хорошо освещена.
  • Наденьте наушники или применяйте затычки для ушей.
  • Используйте пластиковые палочки со стерильными тампонами. Диаметр и длина тампона должны соответствовать возрасту и массе свиньи.
  • Не рекомендуются деревянные палочки, поскольку они могут поломаться, если животное будет дергаться, обороняясь.
  • Тампон должен быть изготовлен из синтетического волокна (дакрон или вискоза), а не из хлопка, особенно если образцы будут исследовать методом ПЦР. Хлопок плохо «отдает» взятый мазком материал. Кроме того, деревянные палочки с тампонами из хлопка могут содержать вещества, которые инактивируют вирусы и замедляют тестирование методом ПЦР.
  • Если образцы предназначены для бактериального посева, применяйте пластиковую пробирку с наполнителем (транспортной средой). Для ПЦР-теста — без среды.
  • Если исследования будут проводить двумя методами, следует взять по два образца от животного, поместить в соответствующие пластиковые пробирки.
  • Количество образцов, необходимых для анализа, может изменяться в зависимости от вида заболевания и уровня его распространения в стаде, точности выборки, метода исследования мазков и цели их забора (таблица 1, 2).
  • Используйте новую чистую, небеленую хлопчатобумажную веревку диаметром в соответствии с размером и возрастом свиней (примерно 1 см для отъемышей, 2 см для свиней на доращивании-откорме). Не используйте веревки из синтетического материала, поскольку они не будут поглощать достаточное количество слюны для анализа.
  • Длина веревки зависит от способа ее закрепления в отряде, но должна быть такой, чтобы свиньи смогли ее грызть.
  • Одной веревки достаточно для забора образцов слюны от 10-15 свиней.
  • Для каждого загона используйте отдельную веревку.
  • Для каждой пробы оральной жидкости используйте стерильную пробирку для сбора клинического материала объемом 5-12 мл.
  • В случае применения системы жидкого кормления, образцы следует забирать не раньше, чем через 2 часа после кормления, так как свиньи будут пассивные и не слишком интересоваться веревкой.
  • Рекомендуемое минимальное количество образцов для анализа — 2 (чтобы свести к минимуму вероятность ошибочно негативного диагноза), но оно может меняться в зависимости от степени распространения заболевания в стаде, этиологии болезни, которую подозревают, метода анализа клинического материала и его точности.

Таблица 1

Количество образцов назальных мазков, необходимых для выявления заболевания в стаде

Источник: Dr. Heiko Nathues, Royal Veterinary College, 2018

Таблица 2

Рекомендуемое количество назальных мазков, необходимых для оценки уровня распространения заболевания

Источник: Dr. Heiko Nathues, Royal Veterinary College, 2018

ТЕХНИКА ЗАБОРА КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА

Назальные мазки

  1. Поместите животное в отдельный станок или зажмите в угол отряда, ограничив его движение. Зафиксируйте рыло животного. Для этого можно применять специальный зажим. Обратите внимание на правильное его расположение — он должен находиться за первыми премолярами.
  2. Очистите нос сухой бумажной салфеткой.
  3. Глубоко просуньте тампон в носовую пазуху и оставьте на 3 секунды. Чтобы не травмировать животное, не стоит слишком давить на тампон.
  4. Поверните тампон на треть вокруг центральной оси и оставьте еще на 3 секунды. Еще раз повторите.
  5. Поместите тампон в пробирку.
  6. Сразу же промаркируйте пробирку: например, укажите номер ушной бирки животного (идентификационный номер), используя водо- и спиртостойкий маркер.

Оральные жидкости

  1. Разместите веревку так, чтобы свиньи в загоне могли легко ее достать (конец веревки должен находиться на уровне рыла), но не у кормушек или поилок. Если в загоне надо зафиксировать более одной веревки, развешайте их подальше друг от друга.
  2. Оставьте веревку на 30 минут. Если свиньи малоактивны, веревку оставляют на 1 час.
  3. Осторожно снимите веревку (она не должна касаться пола). Выжмите слюну с веревки. Для этого вставьте конец, который кусали свиньи, в чистый одноразовый пластиковый мешок. Сожмите веревку, чтобы оральные жидкости стекли.
  4. Отрежьте один из углов пакета и слейте слюну в пластиковую пробирку. Для анализа необходимо забрать минимум 2 мл жидкости.
  5. Если в образце много грязи, частиц корма или иного материала, жидкость следует центрифугировать при 2000 x g в течение 10-и минут.
  6. Сразу же промаркируйте пробирку: номер ушной бирки животного или иным образом идентифицируйте, от которой свиньи взят образец, используя водо- и спиртостойкий маркер.

Комментарий эксперта

Джон Прикетт, эксперт Лаборатории ветеринарной диагностики Университета штата Айова, США

«Забирая оральные жидкости, учитывайте несколько практических аспектов, которые позволят избежать ошибок, в частности:

  • не смешивайте различные образцы оральных жидкостей;
  • для забора образцов применяйте только хлопчатобумажную веревку, ведь синтетические не имеют такой поглощающей способности;
  • свиньи иногда неохотно подходят к веревке, но их можно подготовить, размещая в отряде веревку, пропитанную ароматизатором или сахарным раствором, который будет привлекать животных. После привыкания к такой веревки свиньи будут охотно грызть новую;
  • образцы лучше забирать утром, когда свиньи активны, иначе процесс забора будет длительный;
  • загрязненные образцы часто свидетельствуют о том, что веревка была слишком длинной. Зафиксируйте ее так, чтобы конец был на высоте плеча свиньи;
  • чтобы животные не потеряли интерес к веревке в дальнейшем, не оставляйте ее в отряде надолго; — веревка должна использоваться только раз».

 

Хранение образцов

Образцы следует хранить в холодильнике до момента их передачи в лабораторию, но не дольше 24-36 часов после забора. Если невозможно своевременно доставить образцы, которые будут исследоваться методом ПЦР, их замораживают при температуре -20-80 °С. Размораживают непосредственно перед проведением исследования. Материал не пригоден для бактериального посева после замораживания.

Комментарий эксперта

Ярослав Полонский, врач ветеринарной медицины ООО «Селекционный центр свиноводства», Киевская обл.

«Диагностика имеет важное значение в системе мер борьбы с болезнями животных. Быстро и правильно поставленный диагноз позволяет принять целенаправленные меры по оздоровлению животных с наименьшими потерями.

Для постановки предварительного диагноза нужно сделать анализ клинических признаков болезни. Для окончательного диагноза решающее значение имеет лабораторная диагностика. Материал, который направляют в лабораторию для исследования, может различаться в зависимости от симптомов, которые наблюдают в стаде.

В предприятии применяем лабораторную диагностику для мониторинга здоровья стада, который проводим раз в квартал. Сейчас пользуемся услугами двух диагностических лаборатории — Центра ветеринарной диагностики и лаборатории "Научно-исследовательский учебный центр диагностики болезней животных" Института ветеринарной медицины.

Хотя знаем о способах лабораторной диагностики заболеваний при помощи исследований назальных мазков и образцов оральных жидкостей, работаем традиционно. На исследование направляем сыворотку крови (30 проб различных возрастных групп — по 5 с каждой группы) и, согласно плану диагностических исследований на эпидемическую диарею свиней, ректальные смывы поросят 1-5-дневного возраста в количестве 15 проб. Для отбора ректальных смывов используем тампоны, а для исследования сыворотки крови — стерильные шприц-пробирки объемом 5,5 мл. В диагностические центры направляем правильно отобранные пробы с сопроводительной запиской, упакованные в термоконтейнер (в теплое время года с аккумулятором холода)».

 

За материалами работы Др. Хейко Натха, Королевский ветеринарный колледж (Великобритания)

PigUA.info по материалам журнала Прибыльное свиноводство №1 (49), февраль 2019р.